多因子CBA检测试剂盒
Proteintech多因子试剂盒是基于 CBA 平台开发的高通量、高灵敏度多重蛋白检测产品。其通过不同荧光强度编码的微球，
可同时定量样本中的多种白介素、趋化因子、生长因子等，适用于免疫研究、炎症反应、肿瘤研究、代谢研究、药物研发等领域。
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省样本：最多仅需 25μL样本
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省时间：90min 完成实验
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高通量：最多同时检测 50 种因子
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高灵敏度，批间差小，供应稳定，上新快
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适配多型号流式细胞仪，设备配备 PE、APC、APC-Cy7 三种荧光检测通道即可
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灵活选择：可自由组合不同的靶标（订制）
产品原理及实验流程
▲CBA多因子检测试剂盒流程图
三大产品方案
针对不同研究需求，提供灵活的产品选择——从即用型固定Panel到完全定制化解决方案
固定Panel
即用型·预混优化·快速交付
DIY定制Panel
从500+ELISA验证的靶点库中自由选择，组装您专属的多因子检测Panel
- 500+经验证靶点自由组合
- 按研究需求精准定制
- 4-6周定制交付
- 在线实时查看选中因子
DIY定制您的Panel
从经验证的靶点库中自由选择，3步完成定制。我们将提供快速报价
多因子产品定制
种属验证靶点自由组合，支持人/小鼠/大鼠/灵长类/其它种属五大主流种属
靶标分类
已选靶标
0匹配的现有Panel
0快捷套餐 一键添加常用靶标组合
覆盖分类 (0)
第三步：填写询价信息
填写您的联系信息，我们将在2个工作日内提供详细报价
询价摘要
询价提交成功！
我们的销售团队将在2个工作日内通过邮箱与您联系
数据处理流程
流式导出
导出CSV格式原始数据文件
原始数据
MFI值批量读取
参数配置
设置标准品参数信息
VBA转换
Excel宏自动处理数据
96孔板布局
标准品与样本排布
VBA 工具操作步骤（4 步）
拟合工具
4-PL标准曲线拟合
标曲拟合
自动生成标准曲线
浓度计算
批量样本浓度换算
有效性分析
R²评估与结果判定
开始操作前，请确认以下项目
术语解释
下载VBA数据处理工具
专用的Excel宏文件，支持4-PL标准曲线拟合，自动输出样本浓度
Q：如何判断标准曲线是否有效？
A：有效标准曲线的判定标准：①R² > 0.99（4-PL拟合）；②阴性对照（NTC）的MFI值应低于LLOQ；③阳性对照的回收率在80%-120%范围内；④板内CV值 < 15%。如不满足上述条件，需检查样本处理、试剂效期或重新检测。
Q：样本浓度超出标曲范围怎么办？
A：如样本浓度高于标曲上限（ULOQ），建议对样本进行适当稀释后重新检测，并使用稀释因子校正最终浓度。如浓度低于LLOQ，可标记为"<LLOQ"但不应视为零值。在报告中也需注明检测上限与下限。
Q：如何处理批次间的数据差异？
A：Proteintech CBA试剂盒经过严格质控，批次间差异（CV）控制在15%以内。如需跨批次比较数据，建议在每批次中检测相同参比样本，并使用归一化方法进行校正。我们的VBA工具支持多批次数据合并分析。
Q：检测失败的可能原因有哪些？
A：常见原因包括：①样本溶血或凝血（影响血浆/血清）；②样本反复冻融导致蛋白降解；③试剂未充分平衡至室温；④洗涤不充分导致残留干扰；⑤流式仪器PMT电压偏移。排除以上问题后如仍失败，请联系技术支持。
Q：是否可以检测组织裂解液样本？
A：可以，但需注意：①组织裂解液需使用适当的裂解缓冲液（含表面活性剂和蛋白酶抑制剂）；②裂解后需离心去除细胞碎片；③建议测定总蛋白浓度进行样本间标准化；④某些基质成分可能干扰检测，建议做系列稀释验证线性。
IL-4 完整数据处理示例
原始数据（流式导出MFI值）
| 孔位 | 样本 | IL-4 Count | IL-4 Median PE-H |
|---|---|---|---|
| A1 | 样本 1 | 145 | 432356 |
| A2 | 样本 2 | 125 | 287993 |
| A3 | 样本 3 | 129 | 179658 |
| A4 | 样本 4 | 141 | 114773 |
| B1 | 样本 5 | 118 | 70429 |
| B2 | 样本 6 | 132 | 45401 |
转换后96孔板布局（MFI值，A-B行）
4-PL 拟合结果
常见问题排查
数据处理教学视频
1. 不同仪器数据对比结果
样本测值：人外周血刺激3 天后收集细胞上清，检测各靶标的浓度。同时在三个不同的仪器上进行数据收集和样本数据拟合，在不同的流式细胞仪上测量值非常接近，适配性高。
2、4-PL标准曲线展示
人细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 1标准曲线
人细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 2 标准曲线
小鼠细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 3 标准曲线
3、CBA多因子检测试剂盒验证数据
Q：CBA 与其他多因子检测平台（如 Luminex、MSD）相比有什么区别？
A：CBA 采用双荧光编码微球和标准流式细胞术，兼容任何 PE 通道的流式仪器。相比 Luminex 和 MSD，CBA 成本更低、供货更稳定，Proteintech 提供从试剂到数据分析的一站式服务。我们的 DIY 平台支持 60+ 种经验证靶标的自由组合。
Q：需要多少样本量？支持哪些样本类型？
A：每指标仅需25μL样本，96T试剂盒（含标曲），支持样本类型：血清、血浆、细胞上清、尿液和母乳。组织裂解液建议用含蛋白酶抑制剂的裂解液制备，并测定总蛋白浓度做归一化。特殊基质建议做系列稀释验证线性。
Q：兼容哪些流式细胞仪？
A：任何带 PE、APC、APC-Cy7 通道的流式细胞仪都可以验证：已验证 Beckman CytoFlex、Agilent Novocyte、层浪 ModelFolwer。其他仪器可能需要手动划分群。
Q：DIY定制Panel的交付周期和最小订购量是多少？
A：标准交付周期为 4-6 周，支持加急（最快 3 周）。最小订购量为 1 个试剂盒（96T）。DIY 定制支持 2-50 个靶标自由组合，按研究需求精准匹配。我们提供完整的技术文档和免费的数据分析工具（VBA），帮助您快速获得可发表级数据。批量订购可享受优惠折扣。
Q：检测失败的原因有哪些？
A：常见原因：① 样本溶血或凝血 ② 反复冻融致蛋白降解 ③ 试剂未充分平衡至室温 ④ 洗涤不充分导致残留干扰 ⑤ 流式仪器 PMT 电压偏移。排除以上问题后仍失败请联系技术支持。
Q：数据处理需要使用什么工具？如何获得可靠的标准曲线？
A：我们提供专用的 Excel VBA 宏工具，支持 4-PL 标准曲线自动拟合，自动输出样本浓度。支持 FCS 格式原始数据导入、96 孔板布局定义、多批次数据合并分析。有效标准曲线判定：R²>0.99，阴性对照 MFI 低于 LLOQ，阳性对照回收率 70%-130%，板内 CV<15%。如不满足上述条件，请检查试剂效期和样本处理流程。
Q：Proteintech CBA 试剂盒的灵敏度如何？检测范围是多少？
A：CBA 检测灵敏度可达 pg 级（部分指标低至 0.1 pg/mL），动态范围覆盖 0.1-2000 pg/mL（因靶标而异）。我们的固定 Panel 均经过严格验证，提供详细的验证数据和 QC 报告，确保实验结果可重复。
注意事项
- 操作前务必备份原始数据
- 参数配置错误会导致数据提取失败
- 靶标名称必须与门控命名完全一致（区分大小写）
- 如别名不匹配，请手动确认仪器导出表头
流式导出 → 原始数据 → 参数配置 → VBA 转换 → 96 孔板布局 →8×12 矩阵 → 网站拟合工具 → 标曲拟合 → 浓度计算 → 有效性分析
开始操作前，请确认以下项目：
- 原始数据已从流式细胞仪导出
- 仪器参数已确认（磁珠球数列名、PE 通道 MFI 列名）
- 靶标名称已记录（与门控命名一致）
- VBA 工具已下载并安装，并启用宏
- 已备份原始数据文件
| 术语 | 解释 |
|---|---|
| MFI（荧光强度中位值） | Median Fluorescence Intensity，反映样本荧光信号强度 |
| CV（变异系数） | Coefficient of Variation，评估数据重复性，CV=标准差/均值×100% |
| R2 值 | 决定系数，评估标准曲线拟合度，通常要求 R2>0.99 |
| 96 孔板布局 | 8 行 (A-H) × 12 列 (1-12) 的标准微孔板格式 |
1. 确认仪器参数
不同流式细胞仪的列名不同，需先确认以下参数：
| 仪器品牌 | 仪器型号 | 磁珠球数列名 | PE 通道 MFI 列名 |
|---|---|---|---|
| Beckman | CytoFlex | Count | Median PE-H |
| 层浪 | ModelFolwer | 颗粒数 | Median PE-H |
| Agilent | Novocyte | Count | Median EYFP-H |
| 其他 | 未知 | 需手动确认 | 需手动确认 |
VBA 工具下载链接：点击下载
2、 导入原始数据，打开流式细胞仪导出的原始 Excel 文件，在 VBA 工具"原始数据"表格中，定位到"A1"粘贴原始数据，如下图所示：
3、在VBA工具界面输入以下参数：
- 靶标名称：与流式细胞仪门控命名一致
- 磁珠球数参数：对应原始数据表头（如 Count）
- PE 通道 MFI 参数：对应原始数据表头（如 Median EYFP-H）
VBA 工具参数配置界面如下图所示：
4、点击"查找"按钮，自动生成 8×12 的 96 孔板布局,转换后得到两个矩阵：
MFI 值 96 孔板数据
磁珠球数 96 孔板数据
注意事项：
- 操作前务必备份原始数据
- 参数配置错误会导致数据提取失败
- 靶标名称必须与门控命名完全一致（区分大小写）
- 如列名不匹配，请手动确认仪器导出表头
数据导入框
标准浓度设置
96孔板模拟布板图
| Formula | |
|---|---|
| a value | |
| b value | |
| c value | |
| d value |
| X | Y-reaction value | Y-calculated value | Y-residual |
|---|
| ID | Well(s) | Raw OD value(s) | Replicate Average | Infact OData | Conc. |
|---|
检查指标
- 标准曲线 R² 值（通常要求>0.99）
- 复孔变异系数 CV（通常要求<15%）
- 空白对照背景值
以下是一个完整的 IL-4 数据处理示例：
| 孔位 | 样本 | IL-4 Count | IL-4 Median EYFP-H |
|---|---|---|---|
| A1 | 样本 1 | 145 | 432356 |
| A2 | 样本 2 | 125 | 287993 |
| A3 | 样本 3 | 129 | 179658 |
| A4 | 样本 4 | 141 | 114773 |
转换后 96 孔板布局（MFI 值）
A 行：432356, 287993, 179658, 114773, 70429, 45401, 30697, 22008, 17496, 15239, 14062, 12824
B 行：236662, 143148, 81016, 43656, 23535, 13989, 8285, 5341, 3950, 3246, 2873, 2105
...（完整 8 行×12 列）
拟合结果
R² = 0.998
样本浓度计算结果=拟合值×稀释倍数
| 问题 | 解决方法 |
|---|---|
| 列名不匹配怎么办？ | 手动确认仪器导出表头，在 VBA 工具中对应修改参数 |
| R² 值<0.99 怎么办？ | 检查标准品稀释是否准确，重新拟合或排除异常点 |
| CV 值>15% 怎么办？ | 检查复孔操作是否一致，排除污染或操作误差 |
| 数据为 0 或异常值 | 检查仪器设置、门控位置、试剂有效期 |
产品列表
| 货号 | 中文名称 | 种属 | 靶标名称 |
|---|---|---|---|
| KMF00001 | 人细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 1 | Human | IL-1 alpha, IL-4, IL-6, TNF-alpha |
| KMF00002 | 人细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 2 | Human | IL-4, IL-6, IL-10, IFN-gamma |
| KMF00003 | SpeedyPLEX人Th1/Th2细胞因子（6因子）CBA检测试剂盒Panel | Human | IL-2, IL-4, IL-6, IL-10, TNF-alpha, IFN-gamma |
| KMF00004 | SpeedyPLEX人Th1/Th2细胞因子（6因子）CBA检测试剂盒Panel 2 | Human | IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, TNF-alpha, IFN-gamma |
| KMF00005 | SpeedyPLEX人/非人灵长类Th1/Th2细胞因子（6因子）CBA检测试剂盒Panel | Human/Non-Human Primate | IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, TNF-alpha, IFN-gamma |
| KMF10001 | 小鼠细胞因子（4因子）CBA检测试剂盒Panel 3 | Mouse | IL-1beta, IL-6, IL-10, TNF-alpha |
