长臂生物素标记试剂盒
Cat No : PK20005
Validation Data Gallery
产品介绍
Proteintech的生物素标记试剂盒提供了生物素标记所需全套试剂，试剂盒用于标记含有氨基（NH2-）抗体。试剂盒所含生物素已经被活化，可直接使用，可以用于标记0.1-5 mg抗体。试剂盒还包括缓冲液，超滤管，保护液，抗体无需透析，操作简便，完整流程仅需90min可完成。
基本信息：
结构式：
分子量：567.7
产品特点：
全面:本试剂盒提供了生物素标记所需全部组分。
快速:整个过程仅需90 min。
简便:抗体无需透析。
灵活:可标记抗体范围广 0.1-5 mg。
稳定:产品已进行37度加速4天的稳定性测验，检测结果合格。
应用推荐：此试剂盒用于抗体或蛋白的生物素标记，标记后的抗体经检测适用于绝大多数的ELISA的应用和部分IHC的应用，优先推长臂生物素试剂盒标记抗体，因为在ELISA应用中比较发现，长臂生物素的信噪比更高。
组分 | 规格 | 规格 |
2次标记 | 5次标记 | |
最大可标记抗体量 | 2 mg | 5 mg |
NHS-LC-LC-bio | 0.1 mg/支×2 | 0.1 mg/支×5 |
Labeling buffer | 15 mL ×1 | 30 mL ×1 |
DMF | 200 uL×1支 | 200 uL×1支 |
超滤管 | 0.5 mL×4 | 0.5 mL×10 |
抗体保护液 | 1 mL | 2 mL |
说明：未开封试剂盒2-8℃保存1年，溶解后的生物素 能在2-8 ℃ 保存1周
需自备相关实验物品：
1. 移液器及一次性吸头；
2. 37℃ 恒温培养箱；
3. 离心机
标记原理：
操作步骤：
使用方法
实验前准备
1. 将试剂盒在室温平衡30 分钟；
2. 计算溶解后的生物素用量；
实验操作流程：
1．每0.1 mg的生物素冻干粉使用10 uL DMF溶解，溶解后生物素浓度为 10 mg/mL。
2．取待标记抗体加入超滤管中，并加入适量体积的Labeling buffer，至总体积为0.5 mL，12000×g离心10分钟。（注：a. 超滤管最大体积为0.5 mL；b. 待标记抗体浓度较低时，可先超滤离心一次，再加入适量的Labeling buffer至超滤管中，使待标记抗体的终浓度为2 mg/mL。）
3. 加入适量溶解后的生物素（推荐抗体：生物素的质量比为10:1），比如0.5 mL 2 mg/mL抗体（MW 150000）, 加入浓度为10 mg/mL的生物素 10 uL，并轻轻吹打混匀，放入37℃恒温箱中避光孵育30分钟。
4. 孵育结束后12000×g离心10分钟。
5. 洗涤：加入适量Labeling buffer至上述超滤管中，使终体积为0.5 mL，轻轻吹打混匀，12000×g离心10分钟，并重复此操作一次。
6. 回收：离心结束后，取0.2mL Labeling buffer加入上述超滤管中，轻轻吹打，将滤芯倒转放置于另一个干净的离心管中，6000×g离心10分钟。
7. 定容：收集离心管中的溶液，即为生物素标记完成的抗体。可以依据需要，加入 Labeling buffer，调整浓度，再加入同体积的保护剂，-20度保存。
注意
1. 本试剂盒也可标记其他含有氨基的抗原、HRP、多肽、具体标记比例根据待标记物中氨基的数量而定。
若标记蛋白，建议调整蛋白浓度至2 mg/mL，此时按蛋白：生物素的分子比1:20；
应加入生物素量的计算方法：
2. 对于 10 mmoL的生物素溶液，应加入反应中该生物素体积的计算方法：
3. DMF需要密封干燥保存。
4. 本试剂盒提供的超滤管为10 KD，标记抗原或多肽分子量20 KD及以上。
5. 标记前请根据待标记的抗体量计算好生物素的用量。
其他
实验前请仔细阅读本说明书
本试剂盒仅用于科研，不用于临床诊断