Foxp3 / 转录因子染色缓冲液试剂盒

产品介绍

Proteintech的Foxp3/转录因子染色缓冲液试剂盒包含特殊配制的缓冲液和溶液，可在流式细胞术分析核抗原时获得最佳分辨率和低背景。该试剂盒包含以下组件，用于检测Foxp3等核抗原的染色方案。

本产品含有甲醛，FBS以及叠氮化钠（≦ 0.09%）。

保存条件

4 ℃密封保存，一年有效。详见产品标签。

使用方法

1. 准备工作液：

1）工作液D：取1份PF00011-A (Foxp3 / 转录因子固定/破膜浓缩液 4X) 和3份PF00011-B (Foxp3 / 转录因子固定/破膜稀释液 1X )进行混合，混匀后备用。

2）工作液F：取1份PF00011-C (流式细胞术破膜缓冲液 10X)和9份超纯水混匀后，制备成流式细胞术破膜缓冲液 (1X)备用。

2. 按照Proteintech的细胞表面流式细胞术的实验步骤中说明进行细胞表面染色。

3. 最后一次洗涤后，弃上清，每个EP管中加入2 mL工作液D，缓慢吹打以确保细胞完全重悬。在室温下避光孵育45分钟。

4. 在室温下以 400-600 g离心5分钟，弃上清，向EP管中加入2 mL工作液F，缓慢吹打以确保细胞完全重悬。

5. 将细胞沉淀重悬于 100 μL 工作液F中，静置10-15分钟。

6. 使用抗体推荐用量 如5 μL/Test（或使用工作液F对流式抗体进行预稀释），避光孵育抗体-细胞混合物30-45分钟，用于检测细胞内抗原。

7. 孵育完毕后，每管中加入2 mL工作液F。

8. 在室温下以400-600 g离心试管5分钟，然后弃上清。

9. 每管中加入2 mL工作液F。

10. 在室温下以400-600 g离心试管5分钟，然后弃上清。

11. 将细胞沉淀重悬于0.2 mL工作液F中。

12. 在流式细胞仪上采集样品。

注意

1. 本产品含有甲醛，叠氮化钠，使用时需要做好个人防护措施，佩戴手套、穿实验服等，以避免接触眼睛或皮肤。

2. 孵育时，使液体覆盖住细胞，不要使细胞粘在管壁，防止出现阴性群。

3. 实验过程中注意避光。