Foxp3 / 转录因子染色缓冲液试剂盒
Applications:
FC
Cat no : PF00011
Validation Data Gallery
保存条件
4 ℃密封保存,一年有效。详见产品标签。
使用方法
1. 准备工作液:
1)工作液D:取1份PF00011-A (Foxp3 / 转录因子固定/破膜浓缩液 4X) 和3份PF00011-B (Foxp3 / 转录因子固定/破膜稀释液 1X )进行混合,混匀后备用。
2)工作液F:取1份PF00011-C (流式细胞术破膜缓冲液 10X)和9份超纯水混匀后,制备成流式细胞术破膜缓冲液 (1X)备用。
2. 按照Proteintech的细胞表面流式细胞术的实验步骤中说明进行细胞表面染色。
3. 最后一次洗涤后,弃上清,每个EP管中加入2 mL工作液D,缓慢吹打以确保细胞完全重悬。在室温下避光孵育45分钟。
4. 在室温下以 400-600 g离心5分钟,弃上清,向EP管中加入2 mL工作液F,缓慢吹打以确保细胞完全重悬。
5. 将细胞沉淀重悬于 100 μL 工作液F中,静置10-15分钟。
6. 使用抗体推荐用量 如5 μL/Test(或使用工作液F对流式抗体进行预稀释),避光孵育抗体-细胞混合物30-45分钟,用于检测细胞内抗原。
7. 孵育完毕后,每管中加入2 mL工作液F。
8. 在室温下以400-600 g离心试管5分钟,然后弃上清。
9. 每管中加入2 mL工作液F。
10. 在室温下以400-600 g离心试管5分钟,然后弃上清。
11. 将细胞沉淀重悬于0.2 mL工作液F中。
12. 在流式细胞仪上采集样品。
注意
1. 本产品含有甲醛,叠氮化钠,使用时需要做好个人防护措施,佩戴手套、穿实验服等,以避免接触眼睛或皮肤。
2. 孵育时,使液体覆盖住细胞,不要使细胞粘在管壁,防止出现阴性群。
3. 实验过程中注意避光。