50% 聚乙二醇(PEG)-1450

Cat No : PR40010

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产品介绍

本产品是DMEM基础培养基配制的PEG-1450无菌溶液,PEG-1450含量为50%(体积比),略粘稠,低温下呈淡红状,37℃时为红紫或橙红色。本产品适用于单克隆抗体制备过程中介导细胞融合。

PEG-1450分子能破坏或者改变细胞的膜结构,使细胞接触点处质膜的脂类分子发生疏散和重组,由于细胞接触处双分子层质膜的相互亲和以及彼此的表面张力作用,相邻的细胞发生融合。


保存条件

4或-20保存。有效期两年。


使用方法

使用前将本产品提前预热至37并摇晃均匀(混均前瓶内有时可见白色雾状物属正常现象)。

离心收集混合的待融合细胞,彻底去除上清培养基后混匀细胞,再滴加本产品,60秒—90秒匀速滴完1 mL,滴加过程中保持细胞持续低速晃动,确保本品均匀分散并与细胞充分接触,滴完本产品后静置混合物30秒,再用30-50 mL 37预热的基础培养基,终止融合并完成后续融合步骤。


注意

1. 取用需在无菌条件下进行。

2. 从滴加本产品到完全终止融合这段时间内,尽量控制混合物的温度在30℃—37,以确保有较高的融合效率。

3. 收集的待融合细胞总量建议控制在2×108 ~ 6×108个,使用1 mL PEG-1450介导融合;细胞量过多时建议调整细胞量分批次进行融合,细胞量过少建议适当减少PEG-1450的用量 。

4. 开盖时请按箭头方向开启,小心操作防止铝盖划手。

由于细胞融合实验影响因素较多,对于无细胞融合经验的用户,建议事先做几轮模拟实验确保系统成熟后再做正式实验。